RESUMEN: El objetivo del presente estudio fue evaluar un protocolo de eyaculado y la utilización de diluyentes sobre características seminales macroscópicas y microscópicas en tití cabeza de algodón (Saguinus oedipus) en condiciones de cautiverio bajo estimulación vibratoria del pene (EVP), al igual que establecer parámetros de medidas testiculares. Cinco machos adultos y sanos provenientes del Parque recreativo y Zoológico de Piscilago, Zoológico de Cafam y Fundación Zoológico Santacruz fueron sometidos a captura y posteriormente fueron sedados con un rango de dosis de 5 a 10 mg/kg de peso vivo de clorhidrato de ketamina para minimizar el estrés de la manipulación. Las medidas testiculares obtenidas fueron 1,48 ± 0,26 cm longitud derecho, 1,49±0,32 cm de longitud izquierdo, 0,91 ± 0,19 cm de ancho derecho, 0,98 ± 0,13 cm de ancho izquierdo y 2,04 ± 0,21cm de ancho total. Se obtuvo un 42,85 % de éxito entre combinaciones de 75 y 90 Hz y de 1 y 2,5 mm de amplitud; tiempo de eyaculación de 14:10 ± 9:17 minutos; El semen presentó color blanco opalescente 67 % (2/3) y 33 % (1/3) presentó color amarillento; volumen de 16 ± 15,6 μL; motilidad masal de 2,5 ± 0,71; motilidad individual de 25 ± 21,21; concentración espermática de 133,3 ± 120,03 X106 spz/mL; morfología normal de 57,33 ± 6,11 %; viabilidad de 75 ± 7,07 %. Tres diluyentes fueron probados en semen, en lo cual el diluyente que arrojó mejores resultados de motilidad fue TALP-HEPES. En las medidas de morfometría espermática se obtuvo un área de cabeza de 15,71 ± 0,51μm2, longitud de cabeza de 5,52 ± 0,16 μm, un ancho de cabeza de 3,26±0,18 μm, longitud de pieza media de 7,45 ± 0,03 μm, longitud de cola de 47,96 ± 1,10 μm y longitud total de 60,89 ± 0,96 μm, para las células espermáticas tenidas con Wright y Giemsa. El método de tinción Wright arrojó mejores resultados de coloración, en términos de diferenciación de las estructuras de las células espermáticas. Este estudio permitió la obtención de muestras seminales mediante la técnica Estimulación Vibratoria del Pene, de manera segura y no invasiva para la especie Saguinus oedipus y permitió establecer medidas de morfometría espermática que no habían sido reportadas para esta especie.Sede Fusagasugá